探讨在病理检测中采用TO试剂替代二甲苯的可行性

　　在病理科日常工作中，病理医师对送检标本取材后，病理技师需将待检标本进行固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色、封片等步骤，以上总称为病理制片。其中，透明与染色两步操作中均需使用透明剂对标本进行处理，透明效果直接影响制片质量。二甲苯是常用的组织透明剂，但因其毒性、刺激性气味及环境污染等弊端，均需一种替代产品。近年来，各医院病理科正逐步使用一种新型环保生物组织透明剂（TO试剂），笔者结合本科室使用该试剂的效果介绍如下。　　　　1、材料与方法　　　　1.1 材料选取　　2009年1月-2012年12月临床送检标本，包括脑、眼球、甲状腺、扁桃体、淋巴结、肾脏、乳腺、骨、软骨、食管、胃、肠、子宫等组织，TO试剂由上海宏兹实业有限公司生产提供，二甲苯由成都市科龙化工试剂厂生产提供。　　1.2 方法　　1.2.1 组织处理 按常规程序进行固定、脱水、透明、浸蜡来处理组织。其中，透明过程用TO试剂Ⅰ、TO试剂Ⅱ和二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ进行对照。组织包埋、切片后，染色中同样使用TO试剂Ⅰ、TO试剂Ⅱ和二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ进行对照。　　1.2.2 制片质量 把脱蜡干净、透明度好、着色适中、颜色鲜亮的切片划归为优质片，其次为良好片，再次为差片。　　1.3统计学方法应用。　　SPSS17.0统计软件将两种试剂制片各级制片数进行比较，经检验两种试剂差异无统计学意义（P>0.05）。　　　　2、结果　　　　将10 000张切片进行比较后，两种试剂制片质量见表1.　　　　3、讨论　　　　二甲苯为无色透明液体，与乙醇、液状石蜡、氯仿等可以互溶，沸点为137~140℃，易挥发，有刺激性气味，为中等毒性物质，具有一定致癌性，可对环境造成一定污染。二甲苯结构中含有苯环，属于芳香烃类化合物，长期处于二甲苯环境中可对机体产生危害，二甲苯可经皮肤、呼吸道、消化道吸收，蓄积于肾脏、骨髓等器官。轻症造成自主神经功能紊乱、造血功能下降，重症可致再生障碍性贫血等。病理科工作人员长期暴露于二甲苯环境中，尤其是在快速石蜡制片中，二甲苯需要在加热条件下使用，更加快了二甲苯的挥发，极易引发以上疾病，造成职业性损害。基于以上原因，研究一种新型无毒试剂替代二甲苯成为一项课题，有研究报道松节油替代二甲苯，但单独使用松节油透明效果远差于二甲苯，并且长时间使用造成松节油黏稠，而不易洗脱。　　TO试剂是一种新型生物组织透明剂，其主要以醇类为稀释剂，不含芳香烃类化合物，不产生对人体有害物质，对环境也不造成污染。组织在梯度乙醇脱水后进入浸蜡环节，但乙醇与石蜡不相溶，则乙醇与石蜡间需要一种溶剂作为“桥梁”,该试剂能够与乙醇及液态石蜡互溶，起到“桥梁”作用。TO试剂与二甲苯均对组织有收缩作用，本研究中发现，只要控制透明时间，作用时间适当，TO试剂对组织的收缩作用不致影响组织正常结构。　　TO试剂能够很好溶解制作切片组织中的石蜡，因此，能替代二甲苯用于石蜡切片染色前的组织脱蜡。制作的病理切片组织细胞结构好、核质分明、能够较好显示出细胞及组织结构。在使用过程中需注意以下几点：第一，脱水过程中，乙醇浓度应由低到高，根据组织大小、厚薄调整脱水时间。第二，初次使用TO试剂时应同时更换无水乙醇及石蜡。第三，染色过程中切片脱蜡可适当使用微波炉加热切片，以提高脱蜡效果。　　以上研究表明，在病理技术工作中该新型环保生物组织透明剂能够替代二甲苯，病理切片优良率较高，能够达到临床病理诊断和科研要求，同时也符合实验室环保要求及减少病理工作者身体损害。　　　　【参考文献】　　[1]王伯沄。病理学技术[M].北京：人民卫生出版社，2000:78-79.　　[2]中华人民共和国卫生部。工业企业设计卫生标准[M].北京：人民卫生出版社，1979:11-12.　　[3]丁文清，潘小川。室内污染物与白血病关系研究进展[J].环境与健康杂志，2006,23（1）：83-86.　　[4]詹彦平，张云。松节油代替二甲苯透明剂制片探讨[J].实用医技杂志，2007,14（16）：2 256.　　[5]梁英杰，罗灿峤，董愉，等。新型生物组织透明剂代替二甲苯在病理制片技术中的应用研究[J].2009,16（3）：58-59.　　[6]凌启波，梁英杰。HE制片质控要求[J].临床与实验病理学杂志，2000,16（4）：333