探讨NRM对心脏伤害性感受的调节作用及其调控通路

　　脑干对脊髓背角伤害性信息的传入具有下行抑制性调控作用，电刺激 中 缝 大 核 （ｎｕｃｌｅｕｓ　ｒａｐｈｅｍａｇｎｕｓ，ＮＲＭ）或者于ＮＲＭ内注射谷氨酸或５－羟色胺（５－ｈｙｄｒｏｘｙｔｒｙｐｔａｍｉｎｅ，５－ＨＴ）等受体激动剂，可以对由伤害性躯体或者内脏刺激引起的脊髓伤害感受性反射或者脊髓背角神经元进行抑制性调节，而ＮＲＭ的这种下行抑制性调节作用在解剖学上被认为是由脊髓背外侧束 （ｄｏｒｓｏｌａｔｅｒａｌｆｕｎｉｃｕｌｕｓ，ＤＬＦ）下行介导的。另外有研究显示：　　５－ＨＴ能神经元主要集中在脑干的ＮＲＭ，其下行纤维可达脊髓胶质区／侧角和前脚，尤其是从ＮＲＭ至脊髓后侧角的５－ＨＴ神经通路，因此脊髓内５－ＨＴ递质的释放被认为是脑干下行抑制系统参与镇痛作用的主要因素。然而，这些研究都是以躯体痛或者直肠和膀胱腹部内脏痛为研究靶点，而关于心脏痛的脑干下行性调节却少有研究。为了进一步探讨ＮＲＭ对心脏伤害性感受的下行性调控作用以及参与其中的脊髓通路和５－ＨＴ受体系统的作用，本实验采用Ｊｏｕ等人建立的大鼠心脏－躯体运动 反 射 （ｃａｒｄｉｏｓｏｍａｔｉｃ　ｍｏｔｏｒ　ｒｅｆｌｅｘ，ＣＭＲ）模型，以心包内注射致痛剂辣椒素（ｃａｐｓａｉｃｉｎ，ＣＡＰ）诱发背斜方肌 （ｓｐｉｎｏｔｒａｐｅｚｉｕｓ，ＳＰＴ）肌 电（ｅｌｅｃｔｒｏｍｙｏｇｒａｍ，ＥＭＧ）为指标，分析ＥＭＧ的变化，探讨ＮＲＭ对心脏伤害性感受的调节作用及其调控通路，为心绞痛的临床神经治疗研究提供有效的参考。　　１材料与方法　　１．１　实验动物、主要试剂和仪器　实验选用成年、雄性、健康的Ｓｐｒｇｕｅ　Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）大鼠，体质量２５０～３５０ｇ，由西安交通大学医学院实验动物中心提供，动物合格证号：　　０００８３６６。大鼠在标准清洁级环境中饲养，室温２０℃～２５℃，１２ｈ昼夜循环光照，自由摄食饮水。在保证实验统计的基础上尽量减少实验动物使用的数目。戊巴比妥钠（美国Ｓｉｇｍａ公 司 ）溶 于 生 理 盐 水， 配 制 成２ ×１０－２ｇ·ｍＬ－１溶 液 用 于 动 物 初 始 麻 醉，１ ×１０－２ｇ·ｍＬ－１溶液用于动物麻醉维持；ＣＡＰ（美国Ｓｉｇｍａ公司）溶 于 吐 温８０和 无 水 乙 醇 混 合 溶 液（按１∶１的配比）中，配制成１×１０－３ｇ·ｍＬ－１的母液， 待 实 验 当 天 用 生 理 盐 水 稀 释 到 浓 度 为１ｍｇ·Ｌ－１；麦角新碱（美国Ｓｉｇｍａ公司，５－ＨＴ受体拮抗剂）溶于二甲基亚砜溶液中，待麦角新碱完全溶解后，再将溶有麦角新碱的二甲基亚砜溶液与生理盐水按照３∶７的体积比混合，配制成浓度分别为３×１０－３ｇ·ｍＬ－１和５×１０－３ｇ·ｍＬ－１溶液。　　ＰｏｗｅｒＬａｂ信号采集与分析系统（澳大利亚ＡＤＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ公司），蠕动泵（ＢＴ１００－２Ｊ，保定兰格恒流泵有限责任公司），小动物呼吸机（ＤＷ３０００－Ｂ，淮北正华生物仪器设备有限公司），温度控制仪（原西安医科大学教学仪器厂），动物脑立体定位仪（ＳＮ－２Ｎ，日本Ｎａｒｉｓｈｉｇｅ公司），双线记忆示波器（ＶＣ－１０）、双通道 放 大 器 （ＡＶＭ－１１）、刺 激 器（ＳＥＮ－３３０１）和 隔 离 器 （ＳＳ－２０２Ｊ）（日 本ＮｉｈｏｎＫｏｈｄｅｎ公司）。　　１．２　实验方法 所有大鼠均以２×１０－２ｇ·ｍＬ－１戊巴比妥钠（４５～５５ｍｇ·ｋｇ－１）腹腔麻醉，行常规气管插管和颈外静脉、颈总动脉插管术后，制备ＣＭＲ大鼠模型：于大鼠左侧上胸部第１到第３肋软骨处行开胸术，暴露胸腺和心脏，用玻璃探针在心包 膜 上 开 一 小 孔，将 一 内 径０．０５１ｃｍ、外 径０．０９４ｃｍ，长度１４～１６ｃｍ、远端有数个小洞的硅胶管顺胸腺的中线由之前在心包上所开的孔插入心包，导管顺左心室表面插入约２ｃｍ并缝合在胸腺和各层胸壁组织之间予以固定。心包内可反复注入和抽出液体。每一次从导管内抽出的液体均作为废弃液被处理，以免污染下一次实验。实验开始时，于Ｔ４ ～ Ｔ６水 平 暴 露 大 鼠 左 侧 背 斜 方 肌（ｓｐｉｎｏｔｒａｐｅｚｉｕｓ，ＳＰＴ），插入同芯电极记录大鼠ＥＭＧ反应，ＥＭＧ信号经ＡＶＭ－１１双通道放大器（Ｎｉｈｏｎ　Ｋｏｈｄｅｎ）放大后，由ＰｏｗｅｒＬａｂ软件采集和分析，滤波为１　０００～３　０００Ｈｚ。实验中维持大鼠于 浅 麻 醉 状 态 （１×１０－２ｇ·ｍＬ－１戊 巴 比 妥 钠，１０～１５ｍｇ·ｋｇ－１·ｈ－１）， 体 温 保 持 （３７．０ ±０．５）℃。　　１．３　实验分组及处理方法 大鼠随机分为ＮＲＭ电刺激组（ｎ＝８）、ＮＲＭ电刺激联合ＤＬＦ横断组（ｎ＝８）和ＮＲＭ电刺激联合５－ＨＴ受体拮抗剂鞘内微注射组（ｎ＝１８）。　　①ＮＲＭ电刺激组：为实现电刺 激 大 鼠ＮＲＭ区 的 目 的， 根 据Ｐａｘｉｏｎｓ　＆Ｗａｔｓｏｎ图谱，将一根外径０．４５ｍｍ的钢制导管植入大鼠脑干ＮＲＭ区上方２ｍｍ处（前囟后９．４～１１．８ｍｍ，脑表面下７．０～７．４ｍｍ，中线旁开０～０．５ｍｍ）。同芯刺激电极经此导管进入ＮＲＭ区，使其尖端位置长于导管尖端２ｍｍ。每只大鼠在行ＮＲＭ电 刺 激 前， 先 行 单 纯ＣＡＰ（０．２ ｍＬ，１ｍｇ·Ｌ－１）心包内注射，其诱发的ＥＭＧ活动作为基础对照；间隔５０ｍｉｎ，给予大鼠ＮＲＭ电刺激（７５μＡ）及心包内ＣＡＰ注射，观察ＮＲＭ电刺激对心包 内 注 射ＣＡＰ所 诱 发ＥＭＧ反 应 的 影 响；５０ｍｉｎ后，再次心包内注射ＣＡＰ，观察ＥＭＧ恢复情况，作为后对照。为保证实验数据的准确，每次ＣＡＰ刺激后，用温生理盐水冲洗心包腔５～６次，每次０．２ｍＬ，去除心包内残留的ＣＡＰ，每次心包ＣＡＰ刺激时间间隔５０ｍｉｎ，以避免药物耐受性现象的出现。　　②ＮＲＭ电刺激联合ＤＬＦ横断组：为实现观察脊髓下行调控路径的目的，对大鼠实施Ｃ１～Ｃ３节段的开锥板术并将硬脊膜完全剥离，暴露脊髓组织，实验需要时用精细眼科剪解剖学横断ＤＬＦ。实验过程：ＣＡＰ心包内注射，记录ＥＭＧ活动作为基础对照；５０ｍｉｎ后行ＮＲＭ区电刺激（７５μＡ）及心包内ＣＡＰ注射，记录ＥＭＧ以观察ＮＲＭ的下行性调控作用；继而用精细眼科剪实现ＤＬＦ解剖学阻断，５０ｍｉｎ后再次行ＮＲＭ区电刺激（７５μＡ）及心包内ＣＡＰ注射，记录ＥＭＧ活动以判断ＤＬＦ横断对ＮＲＭ下行性调控作用的影响。ＤＬＦ被横断后，血压下降，但５０ｍｉｎ内血压便得以恢复至基线水平。　　③ＮＲＭ电刺激联合５－ＨＴ受体拮抗剂鞘内微注射组：为观察５－ＨＴ受体拮抗剂麦角新碱在ＮＲＭ下行性抑制性调控中的作用，对大鼠实施脊髓鞘内置管术，即将一根规格为ＰＥ１０的导管通过枕骨大孔植入至脊髓Ｔ３～Ｔ５节段，插入深度为３．５～４．０ｃｍ，为后期脊髓内药物注射做准备。实验过程：先行ＣＡＰ心脏刺激记录ＥＭＧ活动作为基础对照；继而ＮＲＭ电刺激（７５μＡ）及心包内注射ＣＡＰ，记录ＥＭＧ以观察ＮＲＭ的下行性调控作用；间隔５０ｍｉｎ，鞘内注射溶媒（１０μＬ）或麦角新碱（３０或５０μｇ，１０μＬ），１５ｍｉｎ后，行ＮＲＭ区电刺激（７５μＡ）及心包内ＣＡＰ注射，记录ＥＭＧ活动以观察麦角新碱鞘内注射对ＮＲＭ电刺激的影响；５０ｍｉｎ后，行ＮＲＭ区电刺激（７５μＡ）并心包内注射ＣＡＰ，记录ＥＭＧ以判断药物作用的持续时间。实验结束后，将实验中所记录的ＥＭＧ用ＰｏｗｅｒＬａｂ软件进行频率直方图处理。当放电频率高于３ｉｍｐ·ｓ－１时，作为放电的开始；当放电频率低于３ｉｍｐ·ｓ－１时，则作为放电的终止，从而得到每次ＣＡＰ心包内注射所诱发的肌电反应总个数（ｔｏｔａｌ　ｎｕｍｂｅｒ　ｏｆ　ｍｏｔｏｒ　ｕｎｉｔ　ｄｉｓｃｈａｒｇｅｓ，ＴＭＵＤ）。　　每只大鼠第１次心包内注射ＣＡＰ所诱发的肌电反应的ＴＭＵＤ被 标 化 为１００％， 作 为 基 础 对 照（ｃｏｎｔｒｏｌ），其后续肌电反应均以第１次心包内注射ＣＡＰ所诱发的肌电反应的ＴＭＵＤ为分母进行标化，以消除大鼠个体间的差异。电刺激后肌肉放电单位数高于基础对照１１０％或者低于对照９０％，视为有意义，可计入统计范畴。　　１．４　统计学分析 采用ＳＰＳＳ　１０．０统计学软件进行统计分析。各组大鼠ＣＡＰ诱发的背斜方肌ＥＭＧ的变化率以ｘ±ｓ表示，组内各处理因素之间的比较采用单因素方差分析，两两比较采用ＳＮＫ－ｑ检验。　　２结果　　２．１　ＮＲＭ 电刺激下大鼠 ＣＭＲ 的变化 当给予ＮＲＭ　７５μＡ的高强度电刺激时，大鼠ＥＭＧ反应为基础对照的（４８．１５±６．１０）％，明显低于基础对照（Ｐ＜０．０５）；间隔５０ｍｉｎ后，后对照恢复良好，为基础对照的（９６．１６±１．６３）％，与基础对照比较差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。ＮＲＭ对ＣＡＰ诱发的ＥＭＧ反应抑制性调节效应的原始肌电实例图见图１Ａ，ＮＲＭ电刺激位点组织再建图见图１Ｂ。　　２．２　ＮＲＭ 电刺激作用下大鼠ＣＭＲ下行抑制性调节脊髓通 路的变化 于Ｃ１－Ｃ２脊髓节段行双侧ＤＬＦ横断 术，解剖学阻断脊髓ＤＬＦ下行通路。　　ＤＬＦ阻断前，７５μＡ电刺激ＮＲＭ的抑制效应为基础对照的（５２．０８±６．６０）％（Ｐ＜０．０５）；ＤＬＦ阻断后，ＮＲＭ电刺激的抑制效应消失，为基础对照的（９１．８２±２．４２）％（Ｐ＞０．０５）；ＤＬＦ阻断前ＮＲＭ电刺激所产生的肌电效应与ＤＬＦ阻断后比较差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。ＤＬＦ横断面积实例图见图２。　　２．３　麦角新碱对 ＮＲＭ 电刺激下行抑制性调节的翻转效应 ＮＲＭ电刺激联合鞘内微量注射５－ＨＴ受体拮抗剂麦角新碱 （３０和５０μｇ）后所产生的ＥＭＧ反应与ＮＲＭ电刺激比较差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５），但仍未恢复至基础对照水平 （Ｐ＜０．０５）；ＮＲＭ电刺激联合鞘内注射麦角新碱溶媒所产生的ＥＭＧ反应与ＮＲＭ电刺激比较差异无统计学意义 （Ｐ＞０．０５）。　　３讨论　　本实验结果显示：电刺激ＮＲＭ可以对ＣＭＲ产生抑制调节作用；ＤＬＦ横断实验表明ＮＲＭ的下 行抑制性调节是经脊髓通路ＤＬＦ实现的；鞘内注射５－ＨＴ受体拮抗剂麦角新碱部分翻转了ＮＲＭ的下行性抑制效应，说明５－ＨＴ参与了ＮＲＭ对心脏伤害性感受的下行抑制性调节。　　目前，大多数学者认为脑干内源性下行抑制系统主要由中脑导水管周围灰质 （ｐｅｒｉａｑｕｅｄｕｃｔａｌｇｒａｙ，ＰＡＧ）、 延 髓 头 端 腹 内 侧 核 群 （ｒｏｓｔｒａｌｖｅｎｔｒｏｍｅｄｉａｌ　ｍｅｄｕｌｌａ，ＲＶＭ）和一部分脑桥背外侧网状结构组成，经脊髓ＤＬＦ下行对延髓和脊髓背角痛觉感受性信息的传入产生抑制性调制。而ＮＲＭ为ＲＶＭ核群内最重要的一个核团，是内源性镇痛系统的一个重要的中继站。在ＮＲＭ内存在３类神经元：“停止”神经元（ｏｆｆ－ｃｅｌｌ）、“启动”神经元（ｏｎ－ｃｅｌｌ）和“中性”神经元（ｎｅｕｔｒａｌ　ｃｅｌｌ）。许多研究［７－１０］发现：当给予ＮＲＭ高强度的电刺激（５０～２００μＡ）时，可以通过激活ｏｆｆ－ｃｅｌｌ，抑制ｏｎ－ｃｅｌｌ，从而对躯体或内脏伤害性刺激起到抑制性调节作用，如甩尾反射、热板反射和直肠／膀胱－躯体运动反射等，然而这些有关的研究均局限于躯体痛和腹部脏器痛，有关心脏伤害性感受的研究很少。　　本实验采用了一种新的动物模型，通过ＣＭＲ证明了ＮＲＭ对心脏伤害性感受同样具有抑制性调节作用。　　另外许多资料证实脊髓ＤＬＦ参与痛觉下行抑制调节。Ｃｈａｎｄｌｅｒ等研究报 道 脊 髓 电 刺 激（ｓｐｉｎａｌ　ｃｏｒｄ　ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ，ＳＣＳ）可以抑制由心脏内注射缓激肽（ｂｒａｄｙｋｉｎｉｎ，ＢＫ）引起的胸段脊髓丘脑束神经元的兴奋活动。　　Ｚｈｏｕ等研究报道：ＮＲＭ对内脏伤害性感受的抑制性调节效应是通过脊髓ＤＬＦ介导的；在大鼠直肠放置膨胀气囊产生内脏伤害性刺激，观察脊髓背角神经元的电活动，当给予ＮＲＭ高强度电刺激（５０～２００μＡ）时，可减少脊髓背角神经元的神经冲动，而在横断ＤＬＦ后，这种抑制效应随即消失。本实验结果也提示：双侧ＤＬＦ横断后，ＮＲＭ对ＣＭＲ的下行性抑制性调节被阻断，与以往研究结果一致。综合以往的研究资料以及本实验结果，本文作者认为：高强度的电刺激可能主要激活了ＮＲＭ内ｏｆｆ－ｃｅｌｌ，而ｏｆｆ－ｃｅｌｌ的神经冲动主要通过脊髓ＤＬＦ下行发挥调节作用。　　解剖学 研 究 发 现ＮＲＭ约５０％的 神 经 元 为５－ＨＴ能神经元，Ｐｏｔｒｅｂｉｃ等采用抗体微电极技术发现ＮＲＭ内的ｏｆｆ－ｃｅｌｌ／ｏｎ－ｃｅｌｌ／ｎｅｕｔｒａｌ－ｃｅｌｌ均呈５－ＨＴ免疫阳性反应，其中５－ＨＴ免疫阳性反应在ｎｅｕｔｒａｌ－ｃｅｌｌ分布最多，ｏｆｆ－ｃｅｌｌ次之，ｏｎ－ｃｅｌｌ最少。　　而这些５－ＨＴ能神经元８０％以上为缝－脊投射神经元，即其投射纤维主要经脊髓ＤＬＦ下行，分布于同侧脊髓后角，可通过轴－轴突触影响脊髓后角的伤害性感受神经细胞的活动，从而在痛觉调制中发挥镇痛作用。然而，５－ＨＴ对脊髓伤害性反应的调控是复杂的，可能产生抑制作用，也有可能产生易化作用，这可能归因于激活的受体亚型不同、药物注射的剂量不同或者伤害性刺激类型不同。有研究显示：脊髓的５－ＨＴ１、５－ＨＴ２和５－ＨＴ３受体与镇痛效应有关。麦角新碱作为非选择５－ＨＴ１和５－ＨＴ２受体的拮抗剂被广泛使用。本研究通过鞘内注射麦角新碱部分翻转了电刺激ＮＲＭ对ＣＭＲ的抑制作用，提示５－ＨＴ及其受体参与ＮＲＭ对ＣＭＲ的下行性抑制作用，即高强度电刺激可能主要激活了ＮＲＭ内的ｏｆｆ－ｃｅｌｌ，ｏｆｆ－ｃｅｌｌ的神经冲动通过脊髓ＤＬＦ通路下行，促使大量的５－ＨＴ释放至脊髓背角，导致脊髓背角感觉神经元超极化，从而明显提高了疼痛的阈值，而一旦麦角新碱阻断了脊髓背角感觉神经元上的５－ＨＴ受 体，导 致５－ＨＴ的抑制作用减弱或消失。即使鞘内注射高浓度的麦角新碱（５０μｇ）也没有完全阻断ＮＲＭ对ＣＭＲ的抑制效应，这说明还有其他脊髓受体参与了源自ＮＲＭ的抑制性调节过程。研究显示：　　虽然ＮＲＭ内５－ＨＴ能神经元为主导，但是还有不到５０％的神经元为去甲肾上腺素（ｎｏｒｅｐｉｎｅｐｈｒｉｎｅ，ＮＥ）、多种神经肽和γ－氨基丁酸（γ－ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃａｃｉｄ，ＧＡＢＡ）能神经元，其中５－ＨＴ与ＮＥ、５－ＨＴ与阿片肽、５－ＨＴ与ＧＡＢＡ以及ＧＡＢＡ与阿片肽等也多有共存现象，而这些神经元的活动之间存在着复杂的构筑关系，至今还不十分清楚。　　综上所述，本实验中给予ＮＲＭ电刺激可以减弱大鼠ＳＰＴ的紧张性反应，而ＤＬＦ和５－ＨＴ下行纤维系统参与ＮＲＭ对ＣＭＲ下行性抑制性调节。　　临床上许多患者在经历过心绞痛后，会出现上胸部肌肉紧张性的增加，这与本实验中的大鼠模型相似。本研究结果将为心绞痛的临床神经治疗研究提供有效的基础研究资料。　　［参考文献］　　［１］Ｚｈｕｏ　Ｍ，Ｇｅｂｈａｒｔ　ＧＦ．Ｆａｃｉｌｉｔａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ａｔｔｅｎｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａ　ｖｉｓｃｅｒａｌｎｏｃｉｃｅｐｔｉｖｅ　ｒｅｆｌｅｘ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｒｏｓｔｒｏｖｅｎｔｒａｌ　ｍｅｄｕｌｌａ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒａｔ［Ｊ］．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，２００２，１２２（４）：１００７－１０１９．　　［２］Ｓｅｎｇｕｐｔａ　ＪＮ，Ｍｉｃｋｌｅ　Ａ，Ｋａｎｎａｍｐａｌｌｉ　Ｐ，ｅｔ　ａｌ．Ｖｉｓｃｅｒａｌａｎａｌｇｅｓｉｃ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　５－ＨＴ４ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ａｇｏｎｉｓｔ　ｉｎ　ｒａｔｓ　ｉｎｖｏｌｖｅｓ　ｔｈｅｒｏｓｔｒｏｖｅｎｔｒａｌ　ｍｅｄｕｌｌａ（ＲＶＭ）［Ｊ］． Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２０１４（７９）：３４５－３５８．　　［３］Ｓｔｅｅｄｓ　ＣＥ．Ｔｈｅ　ａｎａｔｏｍｙ　ａｎｄ　ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ　ｏｆ　ｐａｉｎ［Ｊ］．Ｂａｓｉｃ　Ｓｃｉ，２０１３，３１（２）：４９－５３．　　［４］Ｊｏｕ　ＣＪ，Ｆａｒｂｅｒ　ＪＰ，Ｑｉｎ　Ｃ，ｅｔ　ａｌ．Ｉｎｔｒａｐｅｒｉｃａｒｄｉａｌ　ａｌｇｏｇｅｎｉｃｃｈｅｍｉｃａｌｓ　ｅｖｏｋｅ　ｃａｒｄｉａｃ－ｓｏｍａｔｉｃ　ｍｏｔｏｒ　ｒｅｆｌｅｘｅｓ　ｉｎ　ｒａｔｓ［Ｊ］．Ａｕｔｏｎ　Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，２００１，９４（１／２）：５２－６１．　　［５］韩曼，孙娜，刘晓华，等．脊髓ＮＭＤＡ受体对心包内注射缓激肽诱发大鼠心脏－躯体运动反射的调节作用［Ｊ］．吉林大学学报：医学版，２０１２，３８（５）：８３２－８３５．　　［６］Ｍｉｌｌａｎ　ＭＪ．Ｄｅｓｃｅｎｄｉｎｇ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｆ　ｐａｉｎ［Ｊ］．Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００２，６６（６）：３５５－４７４．　　［７］Ｕｒｂａｎ　ＭＯ，Ｓｍｉｔｈ　ＤＪ．Ｒｏｌｅ　ｏｆ　ｎｅｕｒｏｔｅｎｓｉｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｎｕｃｌｅｕｓｒａｐｈｅ　ｍａｇｎｕｓ　ｉｎ　ｏｐｉｏｉｄ－ｉｎｄｕｃｅｄ　ａｎｔｉｎｏｃｉｃｅｐｔｉｏｎ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅｐｅｒｉａｑｕｅｄｕｃｔａｌ　ｇｒａｙ［Ｊ］．Ｊ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ　Ｅｘｐ　Ｔｈｅｒ，１９９３，２６５（２）：５８０－５８６．　　［８］Ｚｈｕｏ　Ｍ，Ｇｅｂｈａｒｔ　 ＧＦ． Ｂｉｐｈａｓｉｃ　 ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ　 ｏｆ　 ｓｐｉｎａｌｎｏｃｉｃｅｐｔｉｖｅ　ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｍｅｄｕｌｌａｒｙ　ｒａｐｈｅ　ｎｕｃｌｅｉ　ｉｎ　ｔｈｅｒａｔ［Ｊ］．Ｊ　Ｎｅｕｒｏｐｈｙｓｉｏｌ，１９９７，７８（２）：７４６－７５８．　　［９］Ｒａｎｄｉｃｈ　Ａ，Ｍｅｂａｎｅ　Ｈ，ＤｅＢｅｒｒｙ　ＪＪ，ｅｔ　ａｌ．Ｒｏｓｔｒａｌ　ｖｅｎｔｒａｌｍｅｄｕｌｌａ　ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｖｉｓｃｅｒｏｍｏｔｏｒ　ｒｅｆｌｅｘ　ｅｖｏｋｅｄ　ｂｙ　ｕｒｉｎａｒｙｂｌａｄｄｅｒ　ｄｉｓｔｅｎｓｉｏｎ　ｉｎ　ｆｅｍａｌｅ　ｒａｔｓ［Ｊ］．Ｊ　Ｐａｉｎ，２００８，９（１０）：９２０－９２６．　　［１０］Ｚｈｕｏ　Ｍ，Ｓｅｎｇｕｐｔａ　ＪＮ，Ｇｅｂｈａｒｔ　ＧＦ．Ｂｉｐｈａｓｉｃ　ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆｓｐｉｎａｌ　ｖｉｓｃｅｒａｌ　ｎｏｃｉｃｅｐｔｉｖｅ　ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｒｏｓｔｒｏｖｅｎｔｒａｌｍｅｄｉａｌ　ｍｅｄｕｌｌａ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒａｔ［Ｊ］．Ｊ　Ｎｅｕｒｏｐｈｙｓｉｏｌ，２００２，８７（５）：２２２５－２２３６．　　［１１］Ｃｈａｎｄｌｅｒ　ＭＪ，Ｂｒｅｎｎａｎ　 ＴＪ，Ｇａｒｒｉｓｏｎ　 ＤＷ，ｅｔ　 ａｌ． Ａｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｏｆ　ｃａｒｄｉａｃ　ｐａｉｎ　ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｂｙ　ｓｐｉｎａｌ　ｃｏｒｄｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ　ｆｏｒ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ａｎｇｉｎａ　ｐｅｃｔｏｒｉｓ［Ｊ］．Ｅｕｒ　Ｈｅａｒｔ　Ｊ，１９９３，１４（１）：９６－１０５． ［１２］Ｐｏｔｒｅｂｉｃ　ＳＢ，Ｍａｓｏｎ　Ｐ，Ｆｉｅｌｄｓ　ＨＬ． Ｔｈｅ　ｄｅｎｓｉｔｙ　ａｎｄｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｅｒｏｔｏｎｅｒｇｉｃ　ａｐｐｏｓｉｔｉｏｎｓ　ｏｎｔｏ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ　ｎｅｕｒｏｎｓｉｎ　ｔｈｅ　ｒａｔ　ｒｏｓｔｒａｌ　ｖｅｎｔｒｏｍｅｄｉａｌ　ｍｅｄｕｌｌａ［Ｊ］．Ｊ　Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，１９９５，１５（５Ｐｔ　１）：３２７３－３２８３． ［１３］Ｘｉｅ　ＤＪ，Ｕｔａ　Ｄ，Ｆｅｎｇ　ＰＹ，ｅｔ　ａｌ．Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　５－ＨＴｒｅｃｅｐｔｏｒ　ｓｕｂｔｙｐｅｓ　ｅｎｈａｎｃｉｎｇ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒａｔｓｐｉｎａｌ　ｄｏｒｓａｌ　ｈｏｒｎ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ［Ｊ］．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｐａｉｎ，２０１２，８（５８）：１－１２．　　［１４］Ｊｅｏｎｇ　ＣＹ，Ｃｈｏｉ　ＪＩ，Ｙｏｏｎ　ＭＨ．Ｒｏｌｅｓ　ｏｆ　ｓｅｒｏｔｏｎｉｎ　ｒｅｃｅｐｔｏｒｓｕｂｔｙｐｅｓ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ａｎｔｉｎｏｃｉｃｅｐｔｉｏｎ　ｏｆ　５－ＨＴ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｐｉｎａｌ　ｃｏｒｄ　ｏｆｒａｔｓ［Ｊ］．Ｅｕｒ　Ｊ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，２００４，５０２（３）：２０５－２１１． ［１５］Ｍａｌｌｅｔ　Ｃ，Ｄａｕｌｈａｃ　Ｌ，Ｂｏｎｎｅｆｏｎｔ　Ｊ，ｅｔ　ａｌ．Ｅｎｄｏｃａｎｎａｂｉｎｏｉｄａｎｄ　ｓｅｒｏｔｏｎｅｒｇｉｃ　ｓｙｓｔｅｍｓ　ａｒｅ　ｎｅｅｄｅｄ　ｆｏｒ　ａｃｅｔａｍｉｎｏｐｈｅｎ－ｉｎｄｕｃｅｄａｎａｌｇｅｓｉａ［Ｊ］．Ｐａｉｎ，２００８，１３９（１）：１９０－２００．　　［１６］Ｈａｎ　Ｍ，Ｌｉｕ　ＸＨ，Ｓｕｎ　Ｎ，ｅｔ　ａｌ．Ｌａｔｅｒａｌ　ｒｅｔｉｃｕｌａｒ　ｎｕｃｌｅｕｓｍｏｄｕｌａｔｅｓ　ｔｈｅ　ｃａｒｄｉｏｓｏｍａｔｉｃ　ｒｅｆｌｅｘ　ｅｖｏｋｅｄ　ｂｙ　ｉｎｔｒａｐｅｒｉｃａｒｄｉａｌｃａｐｓａｉｃｉｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒａｔ［Ｊ］．Ｅｕｒ　Ｊ　Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，２０１３，３７（９）：１５１１－１５１８．