目前糖尿病在治疗上主要有注射胰岛素、口服磺酰脲类和双胍类降血糖药物等方法，但是所用药物都不同程度地存在副作用． 因此，开发和研究高效低毒，特别是从天然资源中找到既能治疗糖尿病又无副作用的药物，显得特别重要． 菊三七属 GynuraCass． 植物全世界约 40 种，主要分布于亚洲、非洲及澳大利亚． 可全草入药，有治疗跌打损伤、出血、大骨节病、消炎、抗疟、降血糖等功效． 国内外学者已对菊三七进行了一些化学研究，从中分离得到生物碱和甾体类化合物［1-5］． 菊三七属平卧菊三七 Gynuraprocumbens ( Lour． ) Merr． 含有丰富的有机酸成分及黄酮类化合物，具有很好的抗病毒和增强人体免疫力功效，对乙型肝炎病毒、艾滋病病毒以及流感病毒有显着的抑制作用［6］，此外，还具有降糖作用［7］． 但是应注意到该属很多植物中存在的双稠吡咯啶生物碱对动物和人的肝毒性和致癌作用［8］．目前国内外对菊三七属植物降糖作用鲜有研究． 本文旨在探讨平卧菊三七对糖尿病模型小鼠的降糖作用，为临床糖尿病的药物开发提供新的线索． 1 材料与方法
1. 1 实验仪器TE2101-L 电子天平( 北京赛多利斯仪器系统有限公司) ; 超声波清洗机( 昆山超声仪器有限公司) ;冷冻干燥机( 北京松源华兴科技发展有限公司) ． 1. 2 实验试剂0. 9% 氯化钠注射液( 10 mL，含 NaCl 0. 09 g) ，批号: 0C85D1( 中国大冢制药有限公司) ; 四氧嘧啶( 5 g) ，批号: A7413( Sigma 公司) ; 盐酸二甲双胍片( 0. 25 g ×100 Tab) ，批号: 10071( 北京双鹤药业股份有限公司) ; 安稳免调码血糖仪、安稳免调码瓶装血糖试纸( 三诺生物传感有限公司) ． 1. 3 受试样品平卧菊三七药材购自安国市场． 将干燥药材粉碎后过 20 目筛，物料比为 1∶ 15，70% 乙醇超声提取两次，每次 1. 5 h，减压浓缩，真空冷冻干燥，得干粉作为受试样品． 1. 4 实验环境动物对温度变化的代谢适应性，受健康状况、年龄、手术处理或药物使用因素等影响，环境温度不同时，药品和化学品对实验动物的毒性也有较大差异．过冷或过热，都会影响实验动物的成模率和增加死亡率，影响实验结果的正确性． 本实验选择适宜的温度( 25 ℃) ，在通风的环境下适应性饲养小鼠，自由摄食、饮水． 1. 5 实验动物因小鼠的生命周期短，易于人为控制遗传及环境条件，来源方便，故利用小鼠建立模型，开展生物医学实验． 本实验选择毛色光滑、活动自如、反应灵活、健康、无畸形的雄性 ICＲ 小鼠，SPF 级，体重 22～ 26 g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供． 许可证号: SCXK( 京) 2006-0009． 2 四氧嘧啶致小鼠糖尿病造模条件优化及稳定性考察
2. 1 小鼠性别对造模影响不同性别的动物对四氧嘧啶致糖尿病的敏感性有差异，现已有文献报道，但说法不一． 根据文献报道，在同等实验条件下，雌雄小鼠对造模敏感程度不同，雄性小鼠成模率比雌性小鼠高，但是二者死亡率差别不大［9］． 可归因于雌性小鼠生理原因，血糖值容易波动，测定时不稳定． 因此，选取雄性小鼠造模． 2. 2 小鼠体重对造模成功率的影响雄性 ICＲ 小鼠 20 只，分为两组，18 ～22 g 小鼠10 只、22 ～ 26 g 小鼠 10 只，腹腔注射 200 mg / kg 新鲜配制的四氧嘧啶生理盐水溶液，72 h 后，测定血糖值． 取血糖值大于 16. 5 mmol/L 的小鼠，实验结果显示: 两组小鼠成模率基本一致，但是，16 ～ 20 g 小鼠饲养一周后死亡率较高． 因此选取体重 22 ～ 26 g的小鼠． 2. 3 禁食时间对造模成功率的影响雄性 ICＲ 小鼠30 只，体重22 ～26 g，分为三组，各组小鼠禁食时间依次为 8 h、12 h、16 h，每组小鼠腹腔注射 200 mg/kg 新鲜配制的四氧嘧啶生理盐水溶液，72 h 后取血测定血糖值，取血糖值大于16. 5 mmol / L 的小鼠，三组的成模率分别为: 40%、65%、80%． 实验结果表明: 在相同条件下，禁食时间对造模影响较大． 随着禁食时间的延长，造模小鼠平均血糖值增高，成模率增高． 结果表明，禁食时间16 h为宜． 2. 4 禁食时间对血糖浓度的影响选取 12 只经四氧嘧啶造模成功的 ICＲ 雄性小鼠，分别对其禁食 4 h、6 h、8 h、12 h，测定血糖浓度( 每日只采血一次) ，结果发现，禁食后会出现不同程度假阳性情况，分别为 1 只，3 只，4 只，10 只． 为保证结果真实可靠，将测定血糖前的禁食时间定为 4 h． 3 平卧菊三七粗提物对四氧嘧啶糖尿病模型小鼠的降血糖作用
3. 1 糖尿病动物模型的建立及分组给药雄性 SPF 级 ICＲ 小鼠120 只，体重22 ～26 g． 实验前禁食不禁水． 12 h 后，除空白组 10 只腹腔注射等容积生理盐水外，其他小鼠腹腔注射四氧嘧啶( 200 mg/kg) 造糖尿病模型． 注射后小鼠自由饮食，72 h 后，剪尾取血 0. 1 ～ 0. 2 mL，按葡萄糖测定试纸方法 测 各 鼠 血 糖 水 平，筛 选 出 血 糖 水 平 大 于16. 5 mmol / L的小鼠 70 只，即成糖尿病模型．取四氧嘧啶造糖尿病模型小鼠 70 只，按血糖水平值大小随机分为 7 组，灌胃给药: 阳性组每天灌胃二甲双胍 300 mg/kg; 醇提物高剂量组每天灌胃400 mg / kg; 醇提物中剂量组每天灌胃 300 mg / kg; 醇提物低剂量组每天灌胃 200 mg/kg; 空白组和模型组每天灌胃吐温 －80 水溶液( 2%) ． 每天给药 1 次，连续给药 14 d． 3. 2 平卧菊三七提取物对四氧嘧啶糖尿病模型小鼠饮水量的影响给药后的 5 ～ 14 d 每天记录各组小鼠饮水量．结果显示: 与模型组相比，盐酸二甲双胍和平卧菊三七提取物对四氧嘧啶糖尿病模型小鼠的多饮症状有明显的改善作用( P ＜0. 001) .【1】
3. 3 平卧菊三七提取物对四氧嘧啶糖尿病模型小鼠摄食量的影响给药后的 5 ～ 14 d 每天记录各组小鼠摄食量，结果显示: 与模型组相比，盐酸二甲双胍和平卧菊三七提取物对四氧嘧啶糖尿病模型小鼠的多食症状有明显的改善作用( P ＜0. 001) ．【2】
3. 4 平卧菊三七提取物对四氧嘧啶糖尿病模型小鼠血糖的影响各组小鼠第 14 天末次给药 1 h 后，小鼠剪尾取血( 已禁食 4 h) ，按血糖试纸方法测各组小鼠血糖水平． 各给药组与模型组进行组间比较并观察高、中、低剂量的提取物是否具有降糖作用．各小鼠腹腔注射四氧嘧啶 72 h 后，血糖值均增高至 16. 6 mmol/L 以上，各给药组给药前血糖水平与空白组有显着差异( P ＜ 0. 001) ，说明造模成功． 连续灌胃给药 14 d 后，各组血糖水平组间比较结果见表 3: 给药两周后，各给药组血糖水平较模型组有显着差异( P ＜0. 01) ，说明平卧菊三七提取物能明显抑制四氧嘧啶糖尿病模型小鼠血糖的升高．【3】
4 讨 论
综合上述，短期用药，阳性药盐酸二甲双胍能明显抑制四氧嘧啶糖尿病模型小鼠血糖的升高，并能改善糖尿病小鼠多饮多食症状; 平卧菊三七提取物也能很好地抑制四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的升高，改善多饮多食症状，疗效与剂量无明显线性关系． 关于平卧菊三七的药用机理以及开发应用有待进一步研究． 参 考 文 献 ［1］ Takahira M，Kondo Y，Kusano G，et al． Four new al pha-3-hydroxy spirost-5-ene derivatives from Gynu rajaponicaMakino ［J］． Tetrahedron Lett，1977，54 ( 41) : 3647 － 3650． ［2］ 袁珊琴，顾国明，魏同泰． 菊叶三七生物碱成分的研究［J］． 药学学报，1990，25 ( 3) : 191 －197． ［3］ Helmut W． Two pyrrolizidine alkaloids from Gynura scandens［J］． Phytochemistry，1982，21( 11) : 2767 －2768