黄姑鱼，听起来就是一种鱼类，但这种鱼类在水中有着神奇的作用，到底是什么呢?下面就通过的论文投稿来了解一下吧。
溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)为海洋中正常菌群之一，存在于多种海洋动物中，是鱼、虾、贝等海水养殖动物的条件致病菌。其对养殖动物的致病性多发生在夏季[1]，在水温25～32 ℃下容易流行[2]，另外动物体免疫机能下降或环境恶化时也容易发生[3-5]。2013年，从罗源湾岗屿海区采得的黄姑鱼脾脏中分离获得培养一株形态高度一致的细菌，综合生理生化指标测定、16S rDNA序列同源性分析及系统发育树等结果，确定该菌为溶藻弧菌。 1 材料与方法 1.1 试验鱼样品 患病黄姑鱼3尾，体长29±2 cm，于2013年8月15日采自罗源县海区养殖网箱。
1.2 解剖观察与细菌分离 取典型患病黄姑鱼，70.0%乙醇进行体表消毒后，按照无菌操作的方法，用无菌手术剪解剖，仔细观察内脏症状，分别穿刺肝脏、肾脏、脾脏等组织，划线接种于TSA、TCBS平板，28 ℃恒温培养48 h后，分别挑取形态特征一致的优势菌落进行分离纯化3次，斜面保存。 1.3 生理生化指标测定 分离菌生理生化特征的测定及有关分类鉴定参考文献，结合使用API20NE、API ZYM鉴定系统进行鉴定。 1.4 16S rDNA同源性分析及系统发育树的构建 1.4.1 模板DNA 的制备 挑取单菌落接种TSB培养过夜，离心收集菌体，用细菌基因组DNA提取试剂盒(离心柱型)制备得模板DNA。试剂盒购于北京百泰克生物技术有限公司。 1.4.2 PCR扩增 使用细菌16S rDNA通用引物，正向27F：5’-GAGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’，反向1492r：5’-CTACGGCTACCTT GTTACGA-3’。
PCR反应体系(50 μL)含：10 μL 10×PCR缓冲液(含Mg2+)，2 μL 10 mmol/L 4×dNTP，3 μL 10 μmol/L正向和反向引物，1 μL 5 U/μL Taq DNA聚合酶，1 μL模板。PCR反应条件为：94 ℃变性4 min;94 ℃平衡30 S，55 ℃退火30 S，72 ℃延伸1 min 30 S，30个循环;72 ℃温育10 min。PCR扩增产物经电泳检测后送上海生工生物工程技术有限公司测序。 1.4.3 序列分析 将测得的菌株16S rDNA序列输入到GenBank数据库中进行Blast比对，并与从GenBank数据库中获得的相近序列及常见肠道菌序列一起，运用Clustalx1.83软件进行多重序列比对，然后用MEGA4软件通过自展分析(bootstrapping)，采用邻接法(Neighbor-joining)构建系统发育树。 1.5 药敏实验 用杭州天和微生物试剂有限公司生产的药敏纸片，按常规纸片法进行药敏试验。